Intended Use:
The AESKULISA Herpes Simplex Virus 1 (gG1) IgG is a qualitative and quantitative immunoassay for the demonstration of human IgG antibodies in serum or plasma directed against Herpes Simplex Virus 1 (HSV 1). The AESKULISA Herpes Simplex Virus 1 (gG1) IgG supports in immune status determination as well as in determination of the infecting HSV serotype.
Recombinant Antigens:
Affinity purified internal fragment of glycopotein gG1 of HSV 1
Native Antigens:
n.a.
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biowest agarose 指的是西班牙琼脂糖。
agarose指的是琼脂糖。
大家好,本人是实验新手一枚,目前在学做琼脂糖电泳,我是提取基因组DNA,然后以500ngDNA为模板,按照以下反应体系PCR:Q5高保真热启动2Xmastermix12.5UL;上下游引物终浓度0.5uM,DNA模板500ng,加水补支总体积25ul,反应程序,98℃30s,98℃5S,62℃10s,72℃20s,35或者40个循环,72℃2min,4℃保存,PCR产物取5UL行2%琼脂糖电泳,EB染色,50ul琼脂糖胶加入10mg/mlEB染液5ul,但是结果几乎看不到条带,但是Marker很清晰。最后我把PCR产物用分光光度计测量浓度,发现浓度在400-600ng/ul之间,260/280接近1.80,我想知道我哪里做错了,才导致看不到条带呢?请园子里的老师指教,在此,我首先感谢大家了!
1、α-琼脂糖酶及其生产方法
2、磁性琼脂糖复合微球的制备方法
3、高容量大孔琼脂糖凝胶介质的制备方法
4、一种新琼四、六糖的制造方法
5、一种制造新琼八糖、新琼十糖和新琼十二糖的方法
6、油水两相法制备磁性琼脂糖凝胶微球的方法
TBE作为电泳缓冲液,其中的离子可以导电。并且TE作为DNA的储存液,可以保证DNA免受DNA酶的降解,其中的离子也可以稳定DNA的存在。
最近在做小鼠基因型鉴定,之前做出来的效果很好,没有杂带,只有明显的目的条带,但是最近几次老是出现很多杂带,但是还是看得清目的条带,不影响判断。想请问一下有经验的朋友,这可能是什么原因引起的呢?该怎么避免?谢谢!
影响核酸电泳迁移率的几个因素
1、核酸分子大小
在一定浓度的琼脂糖凝胶中,DNA片段迁移距离和其含有的碱基对数量成反比,因此可以通过与标准条带迁移距离进行比较,由此得出目的条带的大小,但这仅对双链线性的DNA比较准确(DNAMarker一般为双链线状DNA),且对大于20kb的DNA不适用(普通琼脂糖凝胶很难将其分开)。
2、核酸分子构象
DNA分子在电场中的迁移速度不仅和分子量有关,还和它本身的构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中的移动速度不一样,移动速度次序为:共价闭环DNA>线性DNA>开环DNA。当琼脂糖浓度太大时,环状的DNA一般不能进入胶内(停留在孔中)。
3、琼脂糖浓度
同样的线状DNA分子在不同浓度的琼脂糖凝胶中的迁移速度不同,DNA电泳迁移率的对数和琼脂糖凝胶浓度呈线性关系,凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。
琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围
凝胶浓度(%)线性DNA长度(bp)
0.51000~30000
0.7800~12000
1.0500~10000
1.2400~7000
1.5200~3000
2.050~2000
4、电源电压
在低电压时,线状DNA片段的迁移速率和所加电压成正比。但电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分离率达到最大,所使用的电压不得超过5V/cm。
5、电泳方式
用于分离核酸的琼脂糖凝胶电泳可分为垂直型及水平型(平板型)。垂直型电泳,一般用聚丙烯酰胺凝胶做为支撑物。水平型电泳时,凝胶板完全浸泡在电极缓冲液下1-2mm,故又称为潜水式。目前更多用的是后者,因为它制胶和加样比较方便,电泳槽简单,易于制作,又可以根据需要制备不同规格的凝胶板,节约凝胶,因而较受欢迎。
6、嵌入染料的存在
常用的荧光染料EB可以嵌入到堆积的碱基对之间,使其刚性更强,并使其迁移速率有所下降。
7、电泳缓冲液的离子强度
电泳缓冲液的组成和离子强度也能影响DNA的迁移速度。在离子存在很少的情况下(如无用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动;在高离子强度的缓冲液中(如误用10×电泳缓冲液),则电导率很高并产热明显,严重时能引起凝胶融化或DNA变性。
琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。它们的结构相似,但带硫酸根和羧基组分,凝胶能力差。
琼脂糖(Agarose)的特性详细介绍可以登录生物帮看看, http://www.bio1000.com/news/cp/ 生物产品,生物学新技术,生物研发,生物产业,生命科学创新产品。
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